## 单一固定液的性质和用途

### 1. 乙醇（C2H5OH）（ethyl alcohol）

乙醇，又称酒精，具有沉淀白蛋白、球蛋白和核蛋白的能力。由于球蛋白易溶于水，以此酒精固定的标本对细胞核染色效果不佳。酒精可溶解脂肪及类脂体，因此不适用于脂肪的固定。而乙醇能够沉淀肝糖，但肝糖在70％以下酒精中的保持效果不好。单独固定时，使用浓度应为95-100％。无水乙醇的渗透性较差，且会导致组织收缩，适合与醋酸或氯仿混合使用以增强渗透性。乙醇除了固定作用外，尚具有硬化和脱水效果，固定后的组织可在70%乙醇中保存，因此在生物医学制片过程中发挥着重要作用。为了保持无水乙醇的质量，瓶盖应密封，建议在瓶中放置少量无水硫酸铜粉末以吸湿。由于酒精是一种还原剂，因此应避免与重铬酸钾、锇酸等氧化剂共同使用。

### 2. 甲醛（HCHO）（formaldehyde）

甲醛是一种气体，溶于水形成甲醛水溶液或称福尔马林，常用浓度为10％。其配制方法为将10ml市售甲醛液与90ml蒸馏水混合，这样的比例已成为实验室的常规。虽然甲醛不能沉淀白蛋白和核蛋白，但能与其他蛋白质化合，是一种使用简单的固定液，具有良好的穿透性和固定均匀的优势，适合一般器官组织的固定，尤其对脂肪和神经组织效果显著。固定时间一般需24小时，固定后可逐步转移至50％乙醇脱水。由于甲醛是一种强还原剂，因此应避免与铬酸、重铬酸钾和锇酸等氧化剂混合，以防其被氧化成甲酸。在长期贮存中，甲醛易形成多聚甲醛白色沉淀，特别是在低温环境下。为了中和酸性，储存的福尔马林中可以添加少量醋酸钙或碳酸镁。配制10％中性甲醛溶液时，推荐使用40％甲醛、蒸馏水、磷酸二氢钠和磷酸氢二钠的组合。

### 3. 醋酸（CH3COOH）（acetic acid）

纯醋酸在低温时结晶，因此又称为冰醋酸。其使用浓度为0.3%-5%，能够有效沉淀核蛋白，染色质固定效果良好。醋酸在保存染色体时能够接近生理状态，因此几乎所有染色体固定液中均含有醋酸。它具有强渗透性，能够使组织膨胀，常与其他药剂联合使用以减少固定剂对组织的收缩影响，不过醋酸会破坏线粒体和高尔基体，因此不适合在相关的固定液中使用。

### 4. 碘酸（picric acid）

碘酸是一种强酸，呈黄色结晶，溶解于水和乙醇，需在湿润环境中保存。它能沉淀蛋白质，对胞质固定效果良好。不过，碘酸的渗透速度较慢，容易导致组织强烈收缩，因此常与醋酸等药剂配合使用，固定的组织外观会出现黄色。可以用含有碳酸锂的低度酒精溶液来去除颜色残留，对染色没有影响。

### 5. 重铬酸钾（K2Cr2O7）（potassium dichromate）

重铬酸钾呈橙红色结晶，水溶性，毒性强，是一种强氧化剂，不能与乙醇同用。其穿透力强，能使蛋白质不溶，有助于保持细胞质的结构与生理状态相似。重铬酸钾在细胞学固定中是一种良好选择，固定后需用流水冲洗12-24小时以去除残留物。

### 6. 铬酸（H2CrO4）（chromic acid）

铬酸是一种强氧化剂，呈红色或浅褐色结晶，易潮解，适合配制成1%的水溶液。它能有效沉淀蛋白质，但不宜单独使用。铬酸的沉淀效果良好，特别适用于固定肝糖，但需在固定后进行流水冲洗以彻底去除铬酸残留。

### 7. 氯化汞（HgCl2）（mercury bichloride）

氯化汞亦称为氯汞，其呈现白色针状结晶质，是一种极具毒性的药品，对粘膜有腐蚀作用。它能沉淀多种蛋白质，对一般染色效果理想，尤其适用于线粒体及高尔基体的固定。由于氯化汞的穿透力较弱，组织在固定后需用碘酒处理以去除沉淀。

### 8. 四氧化锇（OsO4）（osmium tetroxide）

四氧化锇是一种强氧化剂，适合用于固定脂肪，能够均匀固定蛋白质，保持细胞形态，减少细胞收缩。虽然固定后处理可用苯进行透明化，但由于其高价格与毒性，必须谨慎使用。固定后的切片染色前需经过白化处理。

总结而言，各种固定液各具特性，应根据实验目的的不同合理选择。人生就是博-尊龙凯时在生物医学领域的应用中，必须理解各种固定液的性质，才能灵活有效地应用于研究与诊断中。